基因编辑突变检测原理：

提取基因编辑后细胞的基因组DNA；采用高保真酶PCR扩增基因组DNA中被编辑位点附近的DNA片段；扩增的DNA片段进行变性和退火；最后用T7EI酶切鉴定。

编辑成功的细胞的基因组DNA会产生碱基插入或缺失突变，PCR扩增的DNA片段变性和退火后，未突变的和突变的基因之间，不同突变的基因之间，会形成不完全配对的双链DNA，T7EI酶能识别并酶切不完全配对的双链DNA。

T7EI酶切产物进行电泳分析，通过灰度值分析，即可获得基因编辑效率。

产品组成

分类	成分名称	5T	25T
Part I	Buffer GL1	1 mL	5 mL
	Buffer GL2	1 mL	5 mL
	Buffer GW1	1.3 mL	6.5 mL
	Buffer GW2	1.5 mL	7.5 mL
	Nuclease-free Water	1 mL	5 mL
	DNA Collection Column	5 T	25 T
Part II	Proteinase K	100 μL	500 μL
	Control Template	5 μL	10 μL
	Control Primer Mix	5 μL	10 μL
	2× High-fidelity PCR Premix	50 μL	250 μL
	T7 Endonuclease I (10 U/μl)	5 μL	25 μL
	10× T7 buffer	10 μL	50 μL

实验流程

储存条件

Part I常温保存，Part II -20℃保存。

实验结果

基因编辑效率计算

基因编辑效率= 被剪切条带的灰度总和/ 剪切条带和未被剪切的特异性条带的灰度总和