产品概述

本产品是一种简单、快速、高效的超纯化慢病毒浓缩液，浓缩后病毒滴度可提高10-100倍，并能有效去除病毒上清液中90%以上的血清蛋白、细胞碎片、基因组DNA等，效果显著优于PEG浓缩。

产品组成

产品优势

1. 使用便捷。无需长时间低温孵育，仅用普通冷冻离心机10000 ×g离心2-4 h即可。

2. 病毒浓缩效率高。使用本产品进行浓缩，病毒回收率最高可达约90%，病毒损失量极少。

3. 病毒纯度高，纯化效果好。相较于传统的PEG浓缩，本产品可有效去除病毒上清液中90%以上的杂蛋白，有效降低细胞毒性。

4. 回收的病毒活性滴度高。本产品在浓缩过程中能保持病毒生物活性，能在同等病毒添加量下，达到更好的染毒效果。

储存及运输条件

冰袋运输。试剂置于4 ℃保存，有效期一年。

使用方法

1. 取收集得到的含病毒的上清液，使用0.45 μm针式滤器(PES)过滤以充分过滤细胞碎片。

注：须用聚醚砜膜(PES)的针式滤器过滤，其它材质如硝酸纤维(NC)膜可能对病毒产生吸附。

2. 取过滤后的病毒原液40 mL，加入10 mL 4 ℃预冷的超纯化慢病毒浓缩液（病毒原液的1/4体积），混匀，将离心管转移至预冷的离心机中，4 ℃，10000 xg，离心2-4 h，此时离心管底通常可见少量白色沉淀。

注1: 超纯化慢病毒浓缩液体积应为病毒原液的1/4。

注2：为获得更高病毒回收率，优先推荐离心4 h。

注3：离心机升降速推荐为升9降3，以免破坏离心后的沉淀。

3. 小心吸弃上清，静置1~2 min，吸液去除所有的残余液体，同时注意不要破坏已沉淀的病毒颗粒。向离心管内加入1/10~1/100体积冷的病毒重悬液（无菌PBS缓冲液或DMEM培养液），在4 ℃条件下使用移液器小心吹打20~30次重悬病毒沉淀。根据后续需要，适当分装后，-80 ºC冻存备用。

注1：可通过降低病毒重悬液的体积来获得滴度更高的病毒液。

注2：有时沉淀不可见，需要在沉淀可能形成的区域用移液器小心吹打。

注3：避免剧烈吹打，产生气泡可能导致病毒失活。

注4：全程操作请保持低温，以防慢病毒滴度下降。

注意事项

1. 为避免病毒失活，浓缩前的病毒上清液或浓缩后的病毒都应尽量避免反复冻融。建议分装后标记（病毒名称，年-月-日），置于-80 ℃冰箱保存。

2. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

数据展示

1.将某过表达慢病毒（2E6 TU/mL）使用不同方式浓缩，其中超纯化浓缩离心时间设置为4h，PEG浓缩液低温孵育时间设计为6h，离心后使用PBS重悬沉淀，超滤条件为100KDa离心管，4000xg 4℃离心，体积浓缩60倍，得到的浓缩产物感染HEK293T细胞，染毒44h结果对比如下：

2.某过表达慢病毒（转移质粒大小约10 kb）使用E-poly™ Fast-Lv包装试剂盒正向包毒48小时后收毒，测定病毒上清液出毒滴度为2E6 TU/mL。将样本1（ 20mL 病毒原液）、样本2 （ 10mL 病毒原液）分别使用超纯化慢病毒试剂盒进行40X浓缩，浓缩时间设置2h、4h两组对比，浓缩产物感染HEK293T细胞，染毒69h结果对比如下：

使用BCA蛋白浓度测定试剂盒分别对上述四管浓缩产物进行蛋白残留检测，检测结果如下：