产品与服务

病毒浓缩液


产品货号规格价格
FZ012-033 mL149 元
FZ012-15
15 mL459 元
FZ012-50
25 mL X 2799 元

  • 浓缩步骤操作简便,无需超速离心或过柱纯化
  • 浓缩后病毒滴度可提高5-50倍,回收率可达60%-70%
  • 有效去除杂质,降低病毒液额外细胞毒性

产品概述

  本产品是一种简单、快速、高效的可以用于多种常见重组病毒浓缩的试剂盒,无需超速离心或过柱,浓缩后病毒滴度可提高 5-50 倍,并能有效去除病毒上清液中含有的大量血清蛋白、细胞碎片、基因组 DNA 等。

产品优势

1.  使用便捷。只需将病毒沉淀试剂(5X)含病毒的上清液按照 1:4 的比例混合,4 ºC 孵育后离心,用自备的 PBS 或基础培养基重悬病毒沉淀即可。
2. 无需使用超高速离心机长时间离心,普通冷冻离心机 3000-8000 × g 离心 30 min 即可。
3. 病毒浓缩效率高,纯化效果好。使用本产品进行病毒浓缩后,病毒滴度可提高 5-50 倍,能有效去除病毒上清液中含有的绝大部分蛋白、细胞碎片、基因组 DNA 等。储存及运输条件冰袋运输。试剂置于 4 ℃保存,有效期一年。

使用方法

1. 取收集得到的含病毒的上清液,使用 0.45 μm 针头滤器(PES)过滤以充分沉淀细胞碎片。
注:过滤时,须使用聚醚砜膜(PES)的针头滤器,其它材质如硝酸纤维(NC)膜可能对病毒有吸附作用

2.  取过滤后的病毒原液 40 mL,加入 10 mL 4 ºC 预冷的病毒浓缩液(病毒原液的 1/4 体积),充分混匀后放于 4 ℃,每 30 min 混合一次,共进行 4~6 次混匀。继续于 4 ºC 放置 6-18 h。
注 1:病毒沉淀试剂(5X)粘性较大,需缓慢吸取,缓慢加入,并且与病毒上清液充分混匀。
注 2:病毒沉淀过程中须保持 4ºC,温度偏高时,会导致沉淀不充分。
注 3:4℃孵育充分后通常溶液会变浑浊,更长的孵育时间(如 4℃过夜)有助于提高病毒回收率,如果样品体积大,如超过 100ml,建议延长孵育时间,但孵育时间不宜超过 24h

3. 孵育结束后,3000-8000 x g,4℃离心 30 min,此时离心管底通常可见白色沉淀(有时沉淀不可见),小心吸弃上清,离心 1~2min,吸走残余液体。加入原病毒上清液体积的1/10~1/100 的病毒溶解液(PBS 或培养基)(可通过降低病毒溶解液的体积来获得浓度更大的病毒液),使用移液器小心吹打 20~30 次,重悬病毒沉淀(有时沉淀不可见,需要在沉淀可能形成的区域用移液器小心吹打)。根据后续需要,适当分装后于-80ºC 冻存备用。
注 1:避免剧烈吹打,产生气泡可能导致病毒失活。
注 2:白色沉淀中除病毒颗粒外,还有极少量血清蛋白和基因组 DNA 等

数据展示

NC-shRNA阴性慢病毒使用E-poly™ Fast-Lv包装试剂盒正向包毒48小时后收毒,测定病毒上清液出毒滴度为2E8 TU/mL。而后采用慢病毒浓缩液分别进行10X和20X浓缩后染毒结果对比如下:


某过表达慢病毒(转移质粒大小约10 kb)使用E-poly™ Fast-Lv包装试剂盒正向包毒48小时后收毒,测定病毒上清液出毒滴度分别为5E6 TU/mL1E7 TU/mL。而后采用慢病毒浓缩液分别进行10X和80X浓缩后染毒结果对比如下:


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  • 慢病毒浓缩试剂说明书.pdf

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