CALNP™ RNAi in vitro
CALNP™ RNAi转染试剂是基于多纳特有的CALNP™技术平台开发的高效核酸递送试剂,适合将siRNA高效输送到细胞质...
转染试剂名称 | E-Poly™ Transfection Reagent |
产品特点 | 1. 高转染效率,低毒性 2. 操作便捷,单管顺序加药 3. 联合CALNP™ RNAi in vitro 转染试剂,显著提高共转质粒和siRNA的效率 |
可递送分子 | DNA和siRNA,以及DNA与siRNA的共转 |
细胞类型 | 适用于多种细胞类型,在神经细胞系等难转染细胞上具有优秀的转染效率 |
保存温度 | 2-8 ℃,保存一年 |
根据实验需要按顺序混合配制转染复合液:DNA(RNA)溶液(1mg/mL)、Reagent A、Reagent B溶液推荐体积比为1:50:3各组分混匀后,室温孵育20 min后,进行细胞给药。
图1.多种细胞内质粒转染效率及绿色荧光蛋白表达量
根据实验需要接种细胞过夜,换液后加入siGAPDH转染复合液,转染24 h后测定GAPDH和β-Actin的mRNA表达水平。结果显示,E-Poly™在HEK293T和HepG2细胞上siRNA敲低效率较T-3000更优,但E-Poly™和T-3000的siRNA敲低效率显著低于CALNP™ RNAi in vitro(货号:DN001-10,下面同)转染试剂。
图2.多种转染试剂转染siRNA基因敲减效率比较
根据实验需要接种细胞,E-Poly™、T-3000和T-2000组同时反向转染Fluc-质粒及siRNA,24 h后加入荧光素底物测定荧光水平;E-Poly™+CALNP™组采用E-Poly™转染质粒6 h后,换液加入siRNA-CALNP™转染复合液,转染24 h后加入荧光素底物测定荧光水平。结果显示,E-Poly™在HEK293T和HepG2细胞上转染Fluc-质粒蛋白表达效率显著高于T-3000和T-2000,共转siRNA后敲低效率略优于T-3000,显著优于T-2000组;而E-Poly™+CALNP™联用组siRNA用量更低(siRNA:70 nM vs.10 nM),但Fluc基因敲减效率更优。
注:T-2000、T-3000及E-Poly™组,si-Fluc-RNA浓度为70 nM;E-Poly™+CALNP™组,si-Fluc-RNA浓度为10 nM
图3.多种转染试剂共转质粒DNA和siRNA过表达和基因敲减比较